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細胞培養(yǎng)的需要什么條件

日期:2023-05-10 返回

(1)溫度

溫度過低時細胞生長緩慢甚至不生長。利用冷凍保藏細胞可保持細胞的原有分裂分化能力。溫度過高導致細胞死亡。這主要是由酶和蛋白質所需要的Z適溫度決定的。多數(shù)生物大分子遇到高溫后容易導致空間結構改變或者喪失(變性)。細胞膜遇到高溫后容易變態(tài)。在自然界,既有耐高溫的細胞,也有耐低溫的細胞。在端情況下生長的生物對付端環(huán)境的機制研究在生物進化和農業(yè)、環(huán)保、發(fā)酵工業(yè)中意義重大。

(2)pH

過酸或過堿可導致細胞死亡。這主要與蛋白質的變性和細胞膜的結構受損有關。

(3)滲透壓

細胞內外可溶于水的物質比例和種類決定細胞的膨脹與收縮程度,因為細胞膜是半透膜,只允許對自己有利的物質通過。同一物質在細胞內外的分布的數(shù)量不同,當某一種溶于水的物質在細胞外濃度過大時,有可能導致細胞干癟死亡,這些物質在細胞內過多時導致細胞過量吸水膨脹。細胞膜調節(jié)滲透壓的能力是有限的。

(4)營養(yǎng)物

營養(yǎng)物和水一起,又叫細胞培養(yǎng)液,培養(yǎng)液中含有細胞增殖和生長所需要的各種物質。營養(yǎng)物包括:N源、C源,這些物質與提供能量有關;無機鹽、維生素、激素,這些物質與代謝調節(jié)控制有關。細胞培養(yǎng)液的設計一直是細胞離體培養(yǎng)技術的關鍵。理想的細胞培養(yǎng)液可以同時解決細胞離體培養(yǎng)所需要的pH、滲透壓、營養(yǎng)物、調節(jié)物質的全部需要。在干細胞分化研究與應用中,關鍵是找到一種使干細胞分化成為所需細胞和組織的營養(yǎng)液。相同的人干細胞,放在不同的營養(yǎng)液中分化培養(yǎng)出人的各種臟器,這個昔日的夢想已經開始成為現(xiàn)實。植物細胞的組織培養(yǎng)技術已經基本完善配套。名貴花卉、中草藥、脫毒馬鈴薯、組織培養(yǎng)蓮菜苗等植物細胞與組織培養(yǎng)技術的不斷完善,特別是由于組織培養(yǎng)液的商品化已經被廣大農民普遍接受。

(5)水

水是細胞需要數(shù)量Zda的物質,不同的物種、不同部位、不同生長,期的細胞含水量差別相當大。干旱植物細胞的含水量高達90%。水的需求量一般隨同細胞培養(yǎng)液一起考慮。

(6)無菌條件

體外細胞培養(yǎng)僅僅是對所需的細胞進行培養(yǎng),但環(huán)境中(如空氣)有各種其他微生物,必須對所需細胞進行無雜菌的隔離培養(yǎng)。無菌條件是細胞離體培養(yǎng)Z基本的條件。

(7)光

植物細胞和少數(shù)細菌需要利用光進行光合作用。

(8)氣體

動物細胞需要不斷供給氧氣和排除二氧化碳,植物細胞與此相反。

二氧化碳的作用:調節(jié)pH,有緩沖作用,沒有刺激動物細胞呼吸的功能

一、動物細胞培養(yǎng)的特殊條件

在所有的細胞離體培養(yǎng)中,Z困難的是動物細胞培養(yǎng)。下面是它所需要的特殊條件。

(1)血清:動物細胞離體培養(yǎng)常常需要血清。Z常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子,如激素、微量元素、礦物質和脂肪。有一天人們真正學會了配制和血清一樣的培養(yǎng)液,那時血清才可被取代。在這里,血清等于是動物細胞離體培養(yǎng)的天然營養(yǎng)液。

(2)支持物:大多數(shù)動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養(yǎng)常用玻璃,塑料等作為支持物。

(3)氣體交換:二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養(yǎng)過程中不斷進行調節(jié),不斷維持所需要的氣體條件,每一次開箱操作后的快速恢復對設備的要求可想而知有多難?由此決定了動物細胞離體培養(yǎng)設備要求高、投資大。

二、植物細胞培養(yǎng)的特殊條件

(1)光照:離體培養(yǎng)的植物細胞對光照條件不甚嚴格,因為細胞生長所需要的物質主要是靠培養(yǎng)基供給的。但光照不但與光合作用有關,而且與細胞分化有關,例如光周期可對性細胞分化和開花調控作用,所以以獲得植株為目的的早期植物細胞培養(yǎng)過程中,光照條件特別重要。以植物細胞離體培養(yǎng)方式獲得重要物質,如藥物的過程,植物細胞大多是在反應器中懸浮培養(yǎng)。

(2)激素:植物細胞的分裂和生長特別需要植物激素的調節(jié),促進生長的生長素和促進細胞分裂的分裂素是Z基本的激素。植物細胞的分裂,生長,分化和個體生長周期都有相應的激素參與調節(jié)。和動物細胞相比,植物細胞離體培養(yǎng)對激素要求的原理已經了解,其應用技術也已相當成熟,已經有一套廣泛作為商品使用的培養(yǎng)液。同時解決了植物細胞對水、營養(yǎng)物、激素、滲透壓、酸堿度、微量元素等的需求。

三、微生物細胞培養(yǎng)的特殊條件

微生物多為單細胞生物,野生生存條件比較簡單。所以微生物人工培養(yǎng)的條件比動植物細胞簡單得多。其中厭氧微生物培養(yǎng)比好氧微生物復雜,因為嚴格厭氧需要維持二氧化碳等非氧的惰性氣體濃度,而好氧微生物則只需要通過不斷攪拌提供無菌氧氣。微生物對培養(yǎng)條件要求不如動植物細胞那樣苛刻,玉米漿、蛋白胨、麥芽汁、酵母膏等成為良好的微生物天然培養(yǎng)基。對于一些特殊微生物的營養(yǎng)條件要求,可以在這些天然培養(yǎng)基的基礎上額外添加。

文章出自:病理實驗    想了解更多請關注:http://dogcareservices.net/


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